05. May, 2025

Medios de cultivo empleados en micología

Medios de cultivo empleados en micología

A pesar de la utilidad del examen directo para la identificación de hongos, el método definitivo en la mayoría de los casos es el cultivo. Ya que permite establecer el género y especie del hongo lo que tiene utilidad tanto epidemiológica como en el tratamiento de la infección, el examen microscópico puede ayudar a saber que medios emplear para sembrar al hongo y se pueda recuperar.

Dentro de los medios que habitualmente se emplean en la siembra de muestras son:

Agar Sabouraud Dextrosa: es un medio de cultivo empleado para el aislamiento primario de hongos patógenos y no patógenos. Es un agar peptona suplementado con dextrosa, las peptonas proporcionan compuestos nitrogenados y la dextrosa energía.

  1. Fórmula:
    • Dextrosa                                      20 g
    • Peptona                                       10 g
    • Agar                                             17 g
    • Agua destilada                   1 000 mL
    • pH final                                          7.0

Agar papa dextrosa: al igual que el agar Sabouraud es ampliamente usado en el aislamiento de hongos, es una infusión de papa como fuente de almidones y la dextrosa es la fuente de energía. Puede ser suplementado con antibióticos para inhibir el crecimiento bacteriano. Este medio de cultivo es especialmente usado para revelar pigmentos de hongos, que pueden ser útiles en su identificación.

  1. Fórmula:
    • Infusión de papa                              200 g
    • Destrosa                                              20 g
    • Agar                                                      15 g
    • Agua destilada                            1 000 mL
    • pH final                                          5.6 ± 0.2

Agar mycosel: es un medio selectivo que contiene peptona y dextrosa, además, tiene cicloheximida que inhibe el crecimiento de hongos ambientales y cloranfenicol que inhibe a la gran mayoría de Gram positivos y negativos. Se emplea principalmente para el aislamiento de dermatofitos. Dentro de los hongos patógenos que son inhibidos se encuentra C. neoformans/C. gattii, Aspergillus fumigatus, L. profilans, Talaromyces marneffei y algunas especies de Candida.

  1. Fórmula:
    • Digerido papaico de harina de soja     10 g
    • Dextrosa                                                   10 g
    • Agar                                                           15.5 g
    • Cicloheximida                                          400 mg
    • Cloranfenicol                                            50 mg
    • Agua destilada                                         1 000 mL

Agar de infusión de cerebro-corazón: es un medio de cultivo rico en minerales, nitrógeno, carbohidratos y vitaminas. Se le puede adicionar antibióticos para hacerlo selectivo. Este medio habitualmente se emplea para enfermedades fúngicas sistémicas o invasivas. También se emplea para la recuperación de hongos fastidiosos como Blastomyces spp e Histoplasma capsulatum.

  1. Fórmula:
    •  Infusión de cerebro de becerro    200 g
    • Infusión de corazón de buey         250 g
    • Peptona                                              10 g
    • Glucosa                                                3 g
    • NaCl                                                      5 g
    • HNa2PO4                                             2 g
    • Agar                                                    18 g
    • Agua destilada                          1 000 mL
    • pH final                                                  7.0

Medios de cultivo cromógenicos: Además de los medios de cultivo primario antes mencionados se pueden emplear medios diferenciales cromogénicos para levaduras. Estos medios se basan en la actividad enzimática de las levaduras principalmente del género Candida, ya que cuentan con un sustrato que ante la actividad enzimática especifica cambian de color dependiendo la levadura aislada. La interpretación de los colores de las colonias dependerán del fabricante, por lo que es necesario revisar los insertos de los cultivos.

Aislamiento de los hongos

Algunos autores mencionan que es mejor emplear medios de cultivo en tubo ya que al tener menos espacio de abertura es menor el riesgo de contaminación comparado a las cajas Petri. Dependiendo qué es lo que se quiera aislar o el tipo de muestra, la técnica de siembra será distinta:

  • Los hongos levaduriformes se pueden sembrar por técnicas de agotamiento en las placas Petri.
  • Muestras como cabellos, fragmentos de uñas o escamas se depositan en el centro del agar asegurando que estén en contacto para que exista crecimiento, esto se hace presionando un poco con unas pinzas de disección.

La temperatura y tiempo de incubación también depende del tipo de hongo que se busca:

  • Para la investigación de levaduras usualmente se incuban las placas a 37°C. Crecen habitualmente dentro de las 48 horas posteriores a la siembra.
  • Para dermatofitos u hongos ambientales se emplea una temperatura de 25°C. Los hongos filamentosos pueden requerir días e incluso semanas para su crecimiento.

Bibliografía consultada

Tangarife-Castaño VJ, Flórez-Muñoz SV, Mesa-Arango AC (2015). Diagnóstico micológico: de los métodos convencionales a los moleculares. Med. Lab, 21(5-6):211-42.

Morales Restrepo, Nathalie, & Cardona-Castro, Nora. (2018). Métodos de diagnóstico en micología. CES Medicina, 32(1), 41-52.

Ministerio de Salud del Perú, Instituto Nacional de Salud (2010). Manual de procedimientos y técnicas de laboratorio para la identificación de los principales hongos oportunistas causantes de micosis humanas. Parte 1. Med. Lab.